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已經很久沒有好好地做實驗了，混到自己都心虛。 暑假開始，因為先前投了AICHE的摘要，不做實驗不行了，便開始把積累已久的實驗拿出來做。 6/20(Wed)把反應器裝好滅菌。 滅完第一個小時的時候培養基還是tryptone味，滅完第二個小時氣味聞起來怪怪的。 6/21(Thr)inoculation 耍笨把管線接錯，才開始start up反應器，居然用來saturate air的水被抽進反應器了。 明明檢查了好幾遍，愚蠢的錯誤卻一犯再犯。所以整鍋的濃度都變了，還得重算濃度。 慘事不只一樁，將糾纏在一起的管線解開之後，把培養了一天半的100 ml細胞加進去， 不知啥時居然管線脫落，等我發現的時候已經滴了一地的細胞液。 浪費inoculum事小污染事大，但因為這是好久以來第一次start up一個batch， 還是硬著頭皮養下去了，只能祈禱不會污染。 除非整鍋發臭要不然就算污染了也看不出來，祇是不會生產我要的反應物而已。 整天對著那鍋細菌發呆，因為培養基相當rich，使用了高濃度的蔗糖跟味精， 所以滴出來的地板黏呼呼的很噁心。 暑假剛開始，大家都開始忙碌地作實驗，隔壁兩個女生的反應器也剛架好， 她們養的是厭氧菌，比我的實驗麻煩多了，什麼東西都需要灌氮氣排氧， 幾個女生坐一排，比較對方的反應器，她們看了我的反應器可以控制pH and 溶氧， 居然對著我的反應器讚嘆，說真是太高級了。 哇咧，我看到我未來要跟這台相處好幾年的時候都快哭了， 又老又舊還會漏水，密封似乎有問題，到處都是屋頂防漏的silicone的痕跡。 因為是老闆的設計，所以是從原有的反應器改裝而來，可以說是手工打造的， 也就是說鑿洞、螺絲，什麼東西都暴露在外面。 看看她們的，可是標準的spinner flask呀，乾淨整齊， 只是要接到老舊的pH meter控制酸鹼罷了。 晚上回家前的取樣發現整鍋都是泡沫，泡沫的成因至今不明， 我想可能是我的培養基成分裡面tryptone濃度太高的原因。 把氣閥關小一點，調個安全的轉速我就回家睡覺去了。 6/22(Fri)Bubble everywhere 沒想到泡沫並沒有隨著時間而消失，以我之前的經驗培養到某一段時期產生很多泡泡， 可是等產物出現之後泡沫就會減少。(因為我的產物具有黏性) 沒想到今天來的時候，泡泡已經滿出來了，從反應器的每一個可以突破的角落溢出。 好樣的，這下我知道到底有多少破洞了！ 只好暫時減少供氣降低轉速，看泡泡可不可以不要再冒出來了。 其實這樣並不是個好方法，降低氧氣傳輸對細菌生長不好， 加上我隔壁兩位的菌株都是厭氧，被她們污染就糗了。 今天產了一點產物，用酒精沉澱出來的時候還頗有成就感的。 但是productivity也太低了吧，居然花了那麼久的時間才產一點點。 推測是氧氣不足造成的。 以上流水帳，research blog。